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已超過百萬閱讀量的細胞培養技巧,你還不點開看看?

2017/10/7 10:07:02??????點擊:

細胞培養的路上,有多虐心就有多少要注意的地方。大家擦干眼淚,聽小編幾句話。希望我所說的能幫助你細胞培養的路上,少一點污染,多一點快樂!

 

cell

 

 一: 細胞方面

1. 買細胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 官網或者丁香通。一般上面會有針對細胞的介紹,這樣培養之前可以了解細胞正常生長的狀態圖、傳代、培養基的類型等。

 

2. 不管是買的細胞,還是別人惠贈的細胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存,凍存細胞復蘇后第二天最好更換一次培養基。

 

3. 發現細胞有污染迅速處理掉,特別是當你養了很多種細胞時。細菌污染、真菌污染很容易發現,支原體污染的話,細胞會長的慢,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。

 

4. 不同細胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養細胞的過程中多多摸索。

 

5. 對于嬌弱的細胞,就得細心呵護。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉速和時間。每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況。記住,是每天。

 

二: 操作方面

1. 最好不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套。自己的東西自己包自己烘干。槍頭什么的只要有可能污染就換。

 

2. 嚴格無菌操作。操作臺一定要擺個酒精燈,所有操作緊密圍繞在酒精燈周圍進行。離開過操作臺的東西再進操作臺之前一定要用酒精消毒一遍,稍微烤一下,別直接放到火上,離一段距離。包括一切實驗耗材、儀器、以及你帶著手套的手。

 

3. 水浴鍋很臟,生化培養箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,記得要勤換。身體的各個部分盡量的少接觸不需要接觸的地方的地方。比如實驗臺,又比如培養箱內部。培養箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次。

 

4. 細胞房日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸。晚上離開的時候最好給細胞房照紫外,超凈臺是用完就開。最好的是同一時間就你一個人在細胞房養細胞。

 

5. 動作要既輕柔又有力。動作太重會有一堆一堆的氣泡,動作太輕就吹不下來。剛開始的時候吹細胞太痛苦了,稍微一下就起泡。后來就是吹的時候槍里的培養基不要一次全都壓出來,留一點,槍的最頭部盡量深的在液面以下。(轉載自生物學霸公眾號)

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