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支原體污染檢測和清除

2016/7/5 11:11:56
支原體污染檢測和清除

支原體污染檢測和清除

詳細介紹

下載:支原體污染PCR檢測試劑盒說明書

下載:支原體清除劑說明書

下載:支原體清除實例

支原體污染的檢測和清除

Detection and Elimination of Mycoplasma Contamination


支原體污染是基礎研究和工業生產中一個很常見的問題,可能有高達87%的細胞系發生過支原體污染。支原體在光學顯微鏡下不可見,對培養基的需求有限,一般不會引起培養物混濁,因此細胞被支原體污染一般難以察覺。支原體污染能消耗營養物,促進代謝積累,導致pH改變,誘導或抑制細胞因子表達,并改變培養細胞的代謝、增殖特征及形態。由于支原體污染能影響幾乎每一個細胞參數,所以很多研究都強調常規檢測正在培養的細胞,以確保觀察到的結果不被支原體污染所損害。

細胞的支原體污染,可使用我公司生產的支原體污染PCR檢測試劑盒進行檢測,并使用支原體清除劑去除已確認的支原體污染。


支原體污染PCR檢測試劑盒

PCR Detection Kit for Mycoplasma Contamination


貨號:Myco-P-20                   規格:20個反應

貨號:Myco-P-50                   規格:50個反應

貨號:Myco-P-100                 規格:100個反應

保存條件:保存于-20℃,避免反復凍融。沒有反復凍融的情況下,保質期一年。

     支原體污染PCR檢測試劑盒,可用于檢測細胞培養中的支原體(Mycoplasma)污染,也可作為支原體通用PCR檢測試劑盒使用。支原體是一種沒有細胞壁的微生物,屬于柔膜菌綱(Mollicutes),常被用作柔膜菌綱的統稱。本試劑盒可檢測屬于柔膜菌綱的支原體、脲原體、無膽甾支原體、螺原體、蟲原體、中間原體等超過一百種,與柔膜菌綱以外的其他微生物沒有特異性反應。

     使用支原體污染PCR檢測試劑盒,能在23小時內獲得可靠的結果,是一種靈敏度高、特異性強、快速的檢測支原體污染的方法,具有以下特點:  特異性引物是針對高度保守的支原體16S rRNA序列設計的,可用于檢測非常廣泛的支原體種類,不受真核細胞或細菌DNA干擾。經本試劑盒測試的支原體菌株涵蓋了所有常見的支原體污染種類; 靈敏度極高,最低僅需10個拷貝的支原體基因組即可使檢測呈陽性; 陽性對照所用引物與支原體檢測相同,可幫助判斷假陰性現象,避免假陰性導致的誤判;  包含PCR反應所需的所有成分,只需進行一次PCR反應,使用方便。

對于確定有支原體污染的細胞,可以使用支原體清除劑(http://www.hcgdietersource.com/Product/2756935939.html)進行清除。


 

支原體清除劑

Mycoplasma Elimination Reagent


貨號:Myco-E-h                   規格:0.5 ml

貨號:Myco-E-1                   規格:1 ml

貨號:Myco-E-5                   規格:5 ml

保存條件:室溫下一周,4℃一個月,-20℃兩年。如需保存在-20℃,請分裝以避免反復凍融。注意避光保存。如發現有結晶出現,渦旋振蕩使其溶解即可。



支原體污染是基礎研究和工業生產中一個很常見的問題,可能有高達87%的細胞系發生過支原體污染。支原體是一種直徑約為0.2-0.3 μm、無細胞壁的原核生物,具有變形能力,可透過常見過濾膜(0.22-0.45 μm),常規的無菌過濾方法不能將其去除,細胞培養常用的青霉素和鏈霉素也不能清除培養物中的支原體。支原體污染能改變細胞的DNA、RNA和蛋白質的合成,引起染色體異常,尤其是會改變宿主細胞表面膜蛋白抗原性。

由于支原體污染能影響幾乎每一個細胞參數,所以很多研究都強調常規篩選正在培養的細胞,以確保觀察到的結果不被支原體污染所損害。

支原體清除劑屬于新一代殺菌抗生素,可用于細胞培養中支原體污染的清除,同時能以較低的濃度發揮廣譜的抗革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌的作用,譬如能作用于耐青霉素與鏈霉素的細菌。已證實支原體清除劑對真核細胞無毒性。

本產品包括兩種殺菌成份,即大環內類和喹諾酮類物質。大環內酯能結合細菌50S核糖體亞基,從而抑制蛋白質合成,喹諾酮能抑制細菌DNA消旋酶的活性,因此可以在細菌蛋白質合成及DNA復制兩個層面上抑制細菌生長,明顯增強除菌效果。這兩個靶點在真核細胞內都不存在,所以本產品對真核細胞無毒。將本產品作用濃度加高5倍,對細胞沒有明顯的影響。在更高的濃度下,細胞的生長速率會出現下降,這是由于線粒體呼吸受到抑制的緣故,去除本產品后細胞生長速度即可恢復正常。

由于優越的雙重除菌機制,本產品可避免抗性支原體的產生。喹諾酮可以自由的穿透哺乳動物細胞,可以同時除去游離形式的及真核細胞內部的支原體,這個特點保證了經過處理的細胞不會被支原體感染細胞中釋放出的支原體反復感染。因此可以避免除菌后細胞內支原體的反復感染。

在檢測到支原體已經除盡后再停止加藥,可配合本公司的支原體污染PCR檢測試劑盒(http://www.hcgdietersource.com/Product/5102865729.html )使用。

本產品用于清除細胞培養中出現的支原體污染,不用于人體。

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